En este trabajo, desarrollamos una lista actualizada de la ictiofauna del Parque Nacional Yasuní (PNY) basada en una extensa revisión de la literatura y bases de datos de las colecciones ictiológicas más representativas del Ecuador. Nuestros resultados arrojaron 530 especies de peces de agua dulce distribuidas en 46 familias y 13 órdenes. Este número superó sustancialmente las listas de peces anteriores del PNY y representa una proporción considerable de especies que habitan la cuenca del río Napo, así como toda la cuenca del río Amazonas.